Kjemi

Metoder for genteknologi

Metoder for genteknologi


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

CsCl tetthetsgradient sentrifugering

Når DNA renses ved bruk av tetthetsgradientsentrifugering (isopycnic sentrifugering) i cesiumkloridgradienter, separeres nukleinsyrer på grunnlag av deres tetthet. Denne prosessen gir svært rent, kovalent lukket plasmid-DNA med meget gode utbytter. Vertikale rotorer brukes for tetthetsgradientsentrifugering, der rørene er orientert parallelt med rotoraksen under sentrifugering. Etter sentrifugering må væsken reorientere seg fra vertikal til horisontal.

Prinsippet om å separere kromosomalt og plasmid-DNA finner sted under sentrifugering i nærvær av etidiumbromid. Etidiumbromid interkalerer også i dobbelttrådet DNA som den kovalent lukkede ringformede formen (supercoil) av plasmidet, men lineære DNA-dobbeltråder eller plasmider åpnet ved et enkelttrådbrudd lagres (hakk sirkletDNA) bruker betydelig mer etidiumbromid, noe som øker svømmetettheten til disse DNA-formene. RNA-etidiumbromidkomplekser har en betydelig større tetthet enn den maksimale tettheten til gradienten og akkumuleres ved kanten av røret.

Etter sentrifugering under UV-lys kan DNA-båndet fjernes fra CsCl-gradienten ved hjelp av en kanyle Vær forsiktig ved håndtering av etidiumbromid! Etidiumbromid interkalerer i DNA og er derfor mutagent!


Video: Bioteknologins enzymer (Juli 2022).


Kommentarer:

  1. Shakagrel

    Wow, I spat on this blog about 3 months ago, sales did not think that someone was commenting here :) Actually, there is nothing to discuss from the proposed, for the sake of the test it was added;)) Will they seriously engage in this blog ...

  2. Jawara

    Jeg synes synd, men det er ikke mulig å gjøre noe.

  3. Mazurn

    It does not suit me.

  4. Kazigis

    Will outline your health,

  5. Votaxe

    For en interessant setning



Skrive en melding